Material: sangue EDTA * CD

Preparo: Não é necessário jejum.
* Realizado de 2º a 5º e NUNCA EM VÉSPERAS DE FERIADO devido possíveis dificuldades de logística.

Interpretação:

A citometria em fluxo é um método de mensuração em que as células são suspensas em um meio isotônico e injetadas numa câmara de fluxo, passando enfileiradas, uma a uma, por sensores que analisam suas características físicas e/ou biológicas. A célula é previamente marcada com um anticorpo monoclonal, ligado a uma substância fluorescente. Quando passa pela câmara de fluxo, a luz gerada pelo laser (light amplification by stimulated emission of radiation) incide sobre ela; os ângulos de dispersão da luz e as cores emitidas pelo fluorocromo são guiados pelo sistema óptico do citômetro e detectados por sensores. Estes sinais são transformados em números e histogramas, analisados por um software e impressos quando necessário.
O material a ser estudado é submetido a uma análise por microscopia óptica para avaliação da morfologia e viabilidade celular antes de seu preparo para citometria. No citômetro de fluxo, a população celular é selecionada pelo ângulo de refração da luz, fornecendo informações sobre volume, organelas internas (complexidade) e cores emitidas pelos fluorocromos conjugados aos AcMO/PO. A análise é multiparamétrica (dois ou mais AcMO/PO conjuntamente), com utilização de dois ou mais fluorocromos de espectros de excitação diferentes (cores). Com este recurso é possível isolar a população com marcação previamente conhecida (CDs) e identificá*la por métodos de seleção (divisões gráficas) que circunscrevem estas áreas conforme a necessidade do estudo.

Sinônimos: Doenças proliferativas Crônicas, imunofenotipagem

Indicações: A aplicação clínica da citometria visa responder questões específicas, após a triagem de investigação diagnóstica. Assim, as escolhas dos AcMO/PO utilizados pelo laboratório dependem das informações clínicas fornecidas pelo médico e da análise citológica. O sucesso do estudo depende, portanto, da correta escolha dos soros imunes usados e da forma como os dados são analisados, observando*se número de células, tipo de padrão citológico, predominância celular e padrão citoquímico.
A citometria em fluxo serve para a realização da imunofenotipagem para neoplasia hematológica, na pesquisa e monitoramento de neoplasias hematológicas e no acompanhamento de pacientes com imunodeficiência (painel para pesquisa de imunodeficiência). Os anticorpos monos e policlonais utilizados têm especificidade para diversas populações celulares.

Interpretação clínica: Segue*se a descrição dos diversos anticorpos monos e policlonais utilizados em painel para o diagnóstico das neoplasias hematopoiéticas: Os CD (cluster de diferenciação) são moléculas de marcadores de superfície celular úteis para a identificação e caracterização de leucócitos. Esta nomenclatura foi desenvolvida e é mantido através do workshop Human Leukocyte Differentiation Antigens (HLDA) iniciada em 1982.

CD16: antígeno que identifica células natural killer e granulócitos. Também tem expressão em monócitos e macrofágos.

CD56: células NK e células T citotóxicas. Expressa*se em 10% a 20% dos linfócitos periféricos. Mais de 90% das células CD16+ em repouso, com aspecto morfológico de células granulares ou natural killer são positivas para CD56 e provavelmente representam uma terceira linhagem de células linfóides. Diferencia*se na medula óssea, de onde sai nos estágios iniciais da maturação. É encontrada no sangue periférico, medula óssea e amígdalas, sendo praticamente ausente em outros tecidos linfóides. O CD56 se expressa em células T, citotóxicas ou não. Quando citotóxicas, são IL*2 dependente para liberação de linfocinas responsáveis pela atividade killer. Têm papel na regulação da hematopoiese, na defesa contra células neoplásicas e infectadas por vírus, não requerendo sensibilização prévia pelo antígeno. É morfológica e funcionalmente homogênea, mas imunofenotipicamente heterogênea, dividindo moléculas citoplasmáticas e de superfície com linfócitos, monócitos etc. sua co*expressão com antígenos de histocompatibilidade ainda é controversa. Está presente em células que na maioria das vezes co*expressam CD2, CD5 e CD8. Esta população, quando negativa para CD16, compõe um subgrupo de células T citotóxicas que têm morfologia de células granulares. Tem sido usado como marcador de prognóstico na LMA*M3.

Coleta: Coletar 5,0 mL de sangue total c/ EDTA.
* Coleta deve ocorrer de 2º a 5º e NUNCA EM VÉSPERAS DE FERIADO.